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    《浙江大學》 2012年
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    蓮房原花青素制備工藝及抗氧化活性研究

    周蕓  
    【摘要】:本文以蓮房為對象,針對蓮房原花青素含量影響因素、蓮房原花青素近紅外漫反射光譜法快速測定、蓮房原花青素提取純化工藝及蓮房原花青素抗氧化活性開展系統研究。 蓮房采自浙江杭州、衢州、麗水等地,包括不同產地、不同成熟度、不同采收期、不同干燥方法樣品,共計93份。 1、蓮房原花青素含量影響因素 實驗選取不同干燥方法、不同成熟度、不同產地及不同生長期蓮房樣品,采用比色法測定原花青素及多酚含量,比較不同因素條件下含量差異。結果表明,烘干、曬干、陰干三種不同干燥方法對蓮房外觀和原花青素及多酚含量有較大影響,其中烘干法對蓮房外觀及有效成分含量影響較小,陰干法其次,曬干法影響最大,因此,蓮房采摘后宜采用烘干或陰干法干燥處理,不宜置烈日下暴曬;不同成熟度蓮房原花青素及多酚含量具有明顯差異,成熟樣品含量大于幼嫩(或稱未成熟)樣品,宜選用成熟蓮房;不同產地蓮房中原花青素及多酚含量存在一定變化和差異,經統計分析,這種差異無顯著性;蓮房采收期為每年7月至9月,在采收期內每7-10天采集一次,測定整個采收期蓮房原花青素及多酚含量變化規律,結果表明,采收期內原花青素含量在6%-8%,多酚含量在9%-11%,含量呈區間波動,無明顯趨勢性。 2、蓮房原花青素及多酚含量的近紅外漫反射光譜快速測定 采用近紅外漫反射光譜法,以紫外-可見分光光度法為對照,運用偏最小二乘法建立原花青素和多酚的多元校正模型。原花青素和多酚模型分別采用5個和4個主因子,相關系數0.9621和0.9254。與傳統的原花青素和多酚含量測定采用的比色法相比,采用本方法進行一次測定只需30 s,而比色法需要費時30分鐘以上。本方法能快速、有效測定蓮房原花青素和多酚含量,對蓮房藥材質量進行控制。 3、蓮房原花青素提取工藝 采用熱回流抽提技術,通過正交試驗優化最佳工藝參數。以水為提取溶劑,18倍量溶劑在100℃下提取4 h,循環間隔時間為30 min,每次抽提提取液的1/3。在上述條件下,蓮房原花青素提取轉移率為81.1%。與常規水煎煮提取方法比較,提取率增加4%,提取溶劑減少43%。以乙醇為提取溶劑,50%乙醇12倍量提取2.5 h,提取溫度為90℃,循環間隔為30 min,每次循環抽提提取液的1/3。在上述條件下,蓮房原花青素提取轉移率為91.1%。,與常規乙醇回流提取法相比,提取率增加4.4%,提取溶劑減少25%,提取時間減少37.5%。 綜上所述,與傳統提取工藝相比,熱回流抽提工藝不僅能保證較高的蓮房原花青素提取率,而且能大大節省提取溶劑,縮短提取-濃縮時間,降低能耗,是一種高效節能的提取方法,適宜在工業生產中推廣應用。 4、蓮房原花青素大孔樹脂純化 采用大孔樹脂對蓮房原花青素進行純化,確定蓮房上樣液濃度為0.1-0.2生藥g/mL,上樣流速為1.5 BV/h,上樣量4 BV,以4 BV/h流速水洗4 BV,去除雜質,以40%乙醇洗脫,洗脫流速為2 BV/h,洗脫體積為6 BV,收集洗脫液,減壓濃縮,冷凍干燥得干浸膏粉末。經計算干膏收率為3.8%,原花青素含量80%。 5、多種原花青素來源植物抗氧化能力比較 以DPPH和·OH自由基清除能力及總還原能力指標,比較了九種含原花青素成分的植物抗氧化能力。研究結果表明,蓮房、葡萄籽、地榆、荷葉、桂圓五種植物的抗氧化能力較強,抗氧化能力與其多酚及原花青素含量呈現正相關。 蓮房、葡萄籽、地榆、荷葉、桂圓五種植物采用相同的提取、大孔樹脂富集方法制備原花青素提取物,并測定提取物抗氧化能力,結果表明,蓮房提取物、葡萄籽提取物和地榆提取物的抗氧化能力較強。以上實驗結果提示,除目前生產原花青素的主要原料葡萄籽外,蓮房和地榆也有望作為提取原花青素的植物資源。 6、蓮房原花青素抗氧化作用 從蓮房、葡萄籽中分離純化出原花青素低聚體、原花青素高聚體及原花青素混合物,并測定不同聚合體原花青素的抗氧化能力。從清除DPPH·和·OH自由基能力角度,葡萄籽和蓮房原花青素的作用強于Vc,清除自由基能力與聚合度無明顯相關性;從總還原能力角度,蓮房和葡萄籽原花青素的作用與Vc基本相同。總體分析,兩種來源的原花青素的體外抗氧化能力強于Vc,在原花青素質量濃度相同的情況下,兩種來源原花青素的抗氧化能力沒有顯著差異,在平均聚合度小于5的情況下,其抗氧化能力沒有顯著差異。
    【學位授予單位】:浙江大學
    【學位級別】:碩士
    【學位授予年份】:2012
    【分類號】:R283;R285

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