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      《西北農林科技大學》 2009年
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      粘類小麥雄性不育—恢復系統CMS基因定向轉化的研究

      張瑜  
      【摘要】: 小麥作為世界第一大糧食作物,雜種優勢利用是提高其產量的重要途徑。目前小麥雜種優勢利用主要有三系法(即質核互作雄性不育法)、兩系法和殺雄劑法等,經眾多研究者長期探索都得到了長足的發展。其中,大量研究表明,粘類小麥細胞質雄性不育(CMS)系是小麥雜種優勢利用中很有應用潛力的不育類型。不過,對粘類小麥雄性不育系強優勢組合配制等的研究證實,粘類小麥雄性不育系在配制強優勢組合上較難達到像CHA途徑那樣可以廣泛組配組合且出現強優勢組合的幾率高;但其細胞質雄性不育系育性基因單一,不育性徹底,易恢復性高。有鑒于此,本研究將CHA途徑與粘類小麥雄性不育三系途徑相結合,選用1BS上攜有不育基因rfv_1的非1BL/1RS小麥為供體,以殺雄劑途徑獲得的強優勢組合的母本為受體,實現rfv_1基因的定向轉入,創制粘類非1BL/1RS小麥雄性不育的新保持系,充分發揮兩種途徑的優點,以建拓出一套雜交小麥雜種優勢利用的新途徑,為三系雜交小麥能早日進入生產應用提供理論依據和技術支撐。 通過研究獲得如下重要結果: 1.根尖體細胞隨體鑒定和復合引物PCR分析,不僅能準確地鑒定出1BL/1RS純合易位系,而且可以鑒定出1BL/1RS·1BL/1BS~(rfv_1)易位雜合體;其中復合引物PCR更適合于回交后代中大量目標種子的篩選,為小麥雄性不育基因rfv_1定向轉移到1BL/1RS易位系提供了準確的鑒定方法與依據。 2.利用SDS-PAGE技術對供試材料進行高低分子量亞基分析,發現在低分子量谷蛋白D亞基區存在莫迦和SP4的特征帶,為小麥雄性不育基因rfv_1定向轉移到非1BL/1RS易位系提供了可靠的轉育與檢測依據,而SP4高分子量谷蛋白亞基6+8可作為小麥雄性不育基因rfv_1基因的示蹤特征亞基。 3.利用A-PAGE技術對醇溶蛋白的分析,在ω-醇溶蛋白區也發現莫迦和SP4不同于西農Fp_2的特異蛋白條帶,可作為小麥雄性不育基因rfv_1定向轉移到非1BL/1RS易位系的示蹤蛋白條帶。 4.建立了一套粘類非1BL/1RS小麥雄性不育基因的快速鑒定和定向轉化化殺強優勢組合母本的技術方法體系。 5.本試驗所選受體為強優化殺組合母本,通過不育基因定向導入,結果獲得具有“西農Fp1”、“西農Fp2”性狀,又含有rfv_1基因的新的非1BL/1RS不育系與保持系,這為將粘類非1BL/1RS不育類型推向生產應用,利用粘類小麥雄性不育系組配小麥強優勢組合提供了理論依據和技術支撐,并成功地將三系法和化殺法相結合,使現有強優勢組合可多途徑利用,極大地促進了小麥雜種優勢利用新技術體系的建立。 6.本研究利用染色體定向轉移技術,采用專一核置換回交的方法,將非1BL/1RS普通小麥變種SP4或莫迦中攜有rfv_1不育基因的1BS染色體定向轉移到化殺強優勢組合的母本,并對各代回交后代進行了不育基因定向轉入的檢測鑒定,結果準確,實驗成本低,提高了粘類非1BL/1RS雄性不育新保持系和不育系的定向選育效率,同時這一方法亦可應用于粘類小麥雄性不育恢復系的定向轉育,進而可實現小麥由生理型不育向遺傳型不育的定向轉化,以建拓一套雜交小麥強優勢組合多途徑利用的新方法。
      【學位授予單位】:西北農林科技大學
      【學位級別】:碩士
      【學位授予年份】:2009
      【分類號】:S512.1

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      【引證文獻】
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      中國碩士學位論文全文數據庫 前10條
      1 曹櫟;粘類小麥雄性不育基因rfv_1定向導入的研究[D];西北農林科技大學;2007年
      2 劉勝洪;油菜不育基因在菜心中的表達及應用研究[D];湖南農業大學;2004年
      3 程計華;油菜NSa雄性不育細胞質的分子鑒定及恢復系篩選[D];華中農業大學;2007年
      4 江南屏;大豆核不育突變體CT-2s的細胞形態學研究和不育基因的SSR標記[D];南京農業大學;2008年
      5 李輝;紅麻雄性不育系的選育和不育基因的ISSR標記[D];中國農業科學院;2008年
      6 顧見勛;甘藍型油菜溫敏型雄性不育基因的遺傳及定位[D];華中農業大學;2009年
      7 王鵬科;藍標型小麥核雄性不育、保持系的轉育研究[D];西北農林科技大學;2006年
      8 池慧芳;小麥光溫敏雄性不育性及紅葉耳的QTL分析[D];內蒙古農業大學;2008年
      9 王小艷;甘藍CMS451與RGms03-632不育基因分子標記分析[D];西北農林科技大學;2010年
      10 郭艷萍;粘類小麥雄性不育系育性基因分布區及其育性恢復性研究[D];西北農林科技大學;2006年
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